生物安全柜通过定向气流控制和高效过滤系统实现生物污染防控。目前市售的生物安全柜品牌有：赛默飞 (ThermoFisher)、新加坡Esco、力康 (HealForce)、Telstar。
那么如何设计生物安全柜的验证？如何证明生物安全柜在运行过程中可以保护产品或者样本不受污染？
核心工作原理：生物安全柜通过三重防护机制实现生物污染控制：负压环境、定向气流和高效过滤系统，其协同作用可同时保护操作者、实验样本及环境。
过滤效率：对0.3μm颗粒截留率≥99.97%（H14级），可拦截细菌、病毒等微生物。双重配置：Ⅱ级柜配备送风端（保护样本）和排风端（保护环境）双层过滤
超高效过滤（U15级）：对0.12μm颗粒截留率≥99.9995%，用于Ⅲ级柜或高风险病原体操作
生物安全柜首次验证一般按照4Q（DQ/IQ/OQ/PQ）完成，对生物安全柜的自动控制系统按照3类软件进行确认，记录版本号，并对功能按照设计文件进行简单确认。
三、生物安全柜常见的一些测试项目，本部分仅以为例Ⅱ级B2 ，工作区尺1210×600×660mm的生物安全柜 3Q测试为例，作为简要说明
1.文件确认：供应商提供的所有文件，包括但不限于操作类文件、维护保养类文件、出厂合格证明类文件等。
2.设备/仪表校准：设备/设备自带仪表经过校准且在有效期内，设备/仪表校准可追溯至国家/国际基准，正确粘贴计量标识。
3.设备及其部件：设备外观，各部件是否完整且位置正确, 不存在异常损伤、裂缝等
4.安装环境：设备安装位置是否与客户要求一致，安装区域条件是否能满足说明书等技术文件要求。
5.公用系统连接：设备接入电源电压符合要求，电源线路连接情况，确认电源安全连接并接地
3.报警及互锁功能：设备报警及互锁功能正常且符合使用说明书
4.高效过滤器完整性目的：确认设备的高效过滤器安装结构的完整性符合规定要求接受标准：可扫描检测过滤器在任何点的漏过率应不超过0.01%，不可扫描检测过滤器检测点的漏过率应不超过0.005%。注意：检漏时，需先扫描边框，再扫描过滤器。边框位置不合格，可以采用更换液槽果冻胶或者更换过滤器的方式。扫描过滤器有报警的时候，可以采用十字扫描法精确到位置，防止有漏报。此测试项不合格时，会影响至风速、悬浮粒子、浮游菌微生物、沉降菌、表面微生物结果，此项测试为生物安全柜验证时首个测试项。
5.下降气流流速目的：确认设备下降气流平均流速应在0.25m/s~0.50m/s之间；各测量点实测值与平均流速最大相差应不超过±20%或±0.08m/s。（取最大值）按下列方式在工作区上方高于前窗操作口上沿100mm的水平面上确定测量点位置，多点测量穿过该平面的下降气流流速（见下图，）为例
6.流入气流流速目的：确认流入气流平均风速应不低于0.50m/s，前窗操作口流入气流工作区每米宽度的流量应不低于0.1m3/s。注意：风速不符合标准，会影响至后阶段悬浮粒子、浮游菌微生物、沉降菌、表面微生物测试结果，此测试需在高效检漏完成之后，洁净度测试之前。
7.气流流型目的：设备工作区内的气流应向下，不产生旋涡和向上气流且无死点；气流不从设备中逸出；设备前窗操作口整个周边气流应向内，无向外逸出的气流；设备的前窗操作口流入气流不进入工作区。注意：此测试需在高效检漏，风速确认合格后进行，对于一些关键操作的生物安全柜，此测试会与PQ三静三动同步，动态时需要人员模拟操作执行。
8.噪声：设备在运行时的噪声符合规定要求。（当背景噪声大于57 dB(A)时，实测值参照噪声测量值修正表进行修正。）
9.照度：设备工作台面的照度符合相关规定要求。（布点：测量点之间的距离不超过300mm，与侧壁最小距离为150mm）。布点图如下
10.温升：设备的的温升值符合相关规定要求（温升值=工作区中心温度—环境温度）
11.紫外线辐射强度：紫外线辐射强度符合相关规定要求（布点：测量点之间的距离不超过300mm，与侧壁最小距离为150mm），布点图如下
注意: 紫外的结果会影响设备的灭菌效果，此测试项需在浮游菌，沉降菌，表面微生物测试之前执行
性能确认（行业常规是三静三动，静态也可以在OQ中测试。静态时，设备处于正常运行状态，无人员使用：动态时，设备处于工作状态，人员模拟使用）
1.悬浮粒子：设备正常运行状态下工作区域内的悬浮粒子符合规定要求。粒子计数器的采样口置于设备工作台面200mm高度位置，测量点按下图所示布置
接受标准：结果按照用户需求或洁净室级别接受标准判定是否合格
注意：此测试需在运行确认全部结束后，结果均合格才能执行，默认为A级标准，参照行业标准需要采样1000升，以常规100L/min的粒子计数器计算，测试完一个点需要10分钟，整个项目测试结束需要1小时。
2.浮游菌：设备正常运行状态下工作区域内的浮游菌符合规定要求。测量点分布于工作台面的中心及4个角，测量点按下图所示布置，需要φ90培养基数量5只。
接受标准：结果按照用户需求或洁净室级别接受标准判定是否合格注意：此测试需在悬浮粒子结果合格后执行，默认为A级标准，参照行业标准需要采样1000升，以常规100L/min的浮游菌采样器计算，测试完一个点需要10分钟，整个项目测试结束需要1小时。
3.沉降菌：设备正常运行状态下工作区域内的沉降菌符合规定要求。测量边界距离内表面或工作窗 150mm。将装有营养琼脂的φ90mm 培养皿置于工作台操作面上，测量点按下图所示布置，需要φ90培养基量14只。
接受标准：结果按照用户需求或洁净室级别接受标准判定是否合格
注意：此测试需在悬浮粒子结果合格后执行，按照相关法规，此测试项需要4个小时
4.表面微生物：设备正常运行状态下工作区域内的表面微生物符合规定要求，测量点按下图所示布置，需要φ55培养基量5只。
接受标准：结果按照用户需求或洁净室级别接受标准判定是否合格
下图为验证周期：
-
下降气流：均匀分布测试点（如II级BSC需测25个点），风速通常要求0.25-0.5 m/s。
-
流入气流：前窗开口处风速需达标（如II级A1型≥0.38 m/s），测试时避免人体阻挡。
-
气流烟雾测试：使用烟雾发生器观察气流模式，确保无回流或外泄。
-
上游气溶胶挑战：PAO/DOP浓度均匀（如10-100 μg/L），扫描过滤器表面及边框，下游泄漏率≤0.01%。
-
修复与复测：发现泄漏需密封或更换过滤器后重新测试。
-
培训要求：操作人员需熟悉BSC使用及验证流程，穿戴适当防护装备。
-
气溶胶安全：使用无毒气溶胶（如PAO），避免在污染环境下测试。
-
应急措施：准备消毒剂和应急预案，防止测试意外导致污染
通过系统化的验证流程和严格遵循注意事项，可确保生物安全柜持续为实验室提供可靠防护，保障人员、样本及环境的安全。
-
国家食品药品监督管理局.卫生部令第79号，药品生产质量管理规范[S].2010.
-
药品生产验证指南[M]. 国家食品药品监督管理局，2003.
-
国家食品药品监督管理局. YY 0569-2011，Ⅱ级生物安全柜[S]. 2011.
-
国际标准化组织.ISO146441:2015，洁净室和相关受控环境.第一部分：根据粒子浓度划分空气洁净度等级[S]. 2015.
-
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局&中国国家标准化管理委员会.
-
GB/T 16292-2010，医药工业洁净室（区）悬浮粒子的测试方法 [S]. 2010.
-
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局&中国国家标准化管理委员会.
-
GB/T 16293-2010，医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法[S]. 2010.
-
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局&中国国家标准化管理委员会.
-
GB/T 16294-2010，医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法 [S]. 2010.
-
BSC-Ⅱ A2使用说明书
-
华道（上海）生物医药有限公司设备验证；（生物安全柜）
-
南京金斯瑞生物科技有限公司设备验证；（生物安全柜）
-
上海细胞治疗集团有限公司；（生物安全柜）
-
上海瑞宏迪医药有限公司；（生物安全柜）
-
思埃然医疗系统（苏州）有限公司设备验证；（生物安全柜）
-
上海碳酸钙厂有限公司；（生物安全柜）
-
上海新菲尔生物科技有限公司；（生物安全柜）
-
北京基因启明生物科技有限公司；（生物安全柜）
-
上海凯莱英生物技术有限公司；（生物安全柜）
旦霆科技：专业第三方12+项目经验验证咨询公司，提供计算机化系统验证、实验室仪器验证、公用系统验证、生产设备验证等服务。